|
|
|
|
|
|
资源编号
|
3101HUMGNHu40
|
|
细胞名称
|
THLE-3人永生化肝细胞
|
|
形态特性
|
上皮细胞样
|
|
生长特性
|
贴壁生长
|
|
特征特性
|
THLE-3细胞系来源于人肝脏左叶的原代正常肝细胞，通过SV40大T抗原（SV40largeTantigen）感染实现永生化。具体过程是将含有SV40T抗原的BglI-HpaI片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中生产病毒，进而感染正常肝细胞，从而建立THLE-3细胞系。THLE-2和THLE-3细胞系源自同一供体的正常肝左叶原代肝细胞，使用相同的逆转录病毒载体（含SV40T抗原的BglI-HpaI片段），经PA317包装细胞株生产病毒后感染肝细胞从而建立以上细胞系。THLE-3细胞表达正常成人肝上皮细胞的表型特征，如细胞角蛋白18（cytokeratin18）和白蛋白（albumin），在对数生长期的高传代细胞中也表达细胞角蛋白19（cytokeratin19）。该细胞系具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白（alpha-fetoprotein），在无胸腺裸鼠中不成瘤。THLE-3细胞保留了与化学致瘤物代谢相关的酶，包括细胞色素P450途径（cytochromeP450pathways）、环氧化物水解酶（epoxidehydrolase）、NADPH细胞色素P450还原酶（NADPHcytochromeP450reductase）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase）、过氧化氢酶（catalase）、谷胱甘肽S-转移酶（glutathioneS-transferases）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase）等，能够将苯并[a]芘（benzo[a]pyrene）、N-亚硝基二甲胺（N-nitrosodimethylamine）和黄曲霉毒素B1（aflatoxinB1）等化学致癌物代谢为最终致癌代谢物，这些代谢物可与DNA结合，因此THLE-3细胞是研究药物毒理学和人肝细胞癌病原学及病理的体外模型。细胞在本库通过支原体检测阴性（可供检测报告）。细菌检测结果：阴性；真菌检测结果：阴性。在本库通过STR检测（可供检测报告），与数据库位点匹配率为100%。
|
|
培养条件
|
人肝永生化细胞THLE-3完全培养液配方：BEGMBulletKit培养基(Lonza货号：CC-3170)，90%；优质胎牛血清，10%。或建议直接选择订购经我库官网经优化和测试后可保持THLE-3细胞最佳生长状态，为THLE-3细胞的专用完全培养基（目录号：MD72），用于THLE-3细胞更换培养体系前过渡与保种。气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
|
|
传代方法
|
培养参考：细胞消化时间5min左右。传代比例1:2，传代周期4天左右冻存液配方：培养液（DMEM培养基+10%胎牛血清）92%，DMSO8%细胞运输方式：活细胞可保温装置运输或干冰冻存管运输。注意事项：该细胞培养体系较为特殊且较难培养，强烈建议订购我库THLE-3细胞的专用完全培养基（目录号：MD72），用于THLE-3细胞更换培养体系前过渡与保种。
|
|
传代情况
|
C5
|
|
冻存条件
|
详见《培养条件》一栏中“冻存液配方”内容
|
|
支原体检测
|
细胞在细胞库已通过支原体检测阴性（可供检测报告）
|
|
STR
|
Amelogenin： X X D5S818： 13 13 D13S317： 13 13 D7S820： 8 10 D16S539： 11 12 vWA： 17 18 TH01： 8 9.3 TPOX： 6 9 CSF1PO： 11 12 D19S433： 12 16 D21S11： 30 30 D18S51： 16 20 D6S1043： 11 16 D3S1358： 15 17 Penta D： 8 12 D2S441： 12 14 D8S1179： 11 15 Penta E： 11 14 D12S
|
|
同工酶
|
|
|
染色体
|
-
|
|
使用权限
|
A类
|
|
参考文献
|
|
|
图片
|
|
|
备注
|
本库的细胞系(株)仅用于研究工作，未经许可不得用于其它目的。使用者不得将本库细胞系(株)转让给第三者。使用者在发表研究论文或结果时，应注明细胞系(株)的来源。
|
|
保藏单位
|
中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
|
|
联系方法
|
梁老师，上海市徐汇区岳阳路320号中国科学院分子细胞科学卓越创新中心；021-54920405；ecell@sibs.ac.cn ；微信号:cellcellbank
|